Спиридонов В. Г. РНК-зв'язувальна активність білка оболонки вірусу мозаїки люцерни в тригібридній системі Saccharomyces cerevisiae : Автореф. дис... канд. біол. наук : 03.00.04 / В. Г. Спиридонов; НАН України. Ін-т біохімії ім. О.В.Палладіна. - К., 2004. - 20 c. - укp.Досліджено молекулярні особливості взаємодії білка оболонки вірусу мозаїки люцерни (ВМЛ) з РНК4, яка кодує цей білок. У бактеріальній системі експресії одержано рекомбінантний білок оболонки ВМЛ. На підставі комп'ютерного аналізу амінокислотної послідовності виявлено, що даний білок має дві амінокислотні заміни (<$Eroman {G sub 119 S}> та <$Eroman {Q sub 159 R}>) та коротший за свій природний аналог на три амінокислотні залишки. Виділений та очищений рекомбінантний білок оболонки ВМЛ використано для імунізації кролів та одержання поліклональних антитіл. За допомогою вестерн-блот аналізу, з використанням афінно-очищених поліклональних антитіл, виявлено здатність рекомбінантного білка оболонки ВМЛ до стабільної димеризації за умов in vitro. Встановлено негативний вплив мутації <$Eroman {Q sub 159 R}> у послідовності білка оболонки ВМЛ на формування гомодимерів у дріжджовій двогібридній системі in vivo. За допомогою тригібридної системи вперше визначено, що білок оболонки ВМЛ з високою спорідненістю зв'язується з плюс-ланцюгом РНК4 за умов in vivo. На підставі мутаційного аналізу функціональної частини білка оболонки ВМЛ виявлено, що N-термінальна частина білка оболонки ВМЛ (з 1 до 85 аз) містить РНК-зв'язувальний домен, здатний до активації експресії <$Ebeta>-галактозидази у тригібридній системі. З'ясовано, що C-термінальна частина білка оболонки ВМЛ (з 86 до 221 аз) не бере безпосередньої участі у взаємодії з РНК, однак активність <$Ebeta>-галактозидази у випадку взаємодії лише N-кінцевої частини нижча у п'ять разів на відміну від повнорозмірного білка, що може свідчити про те, Індекс рубрикатора НБУВ: П478.29 мозаїка люцерни
Рубрики:
Шифр НБУВ: РА331075 Пошук видання у каталогах НБУВ
Повний текст Автореферати дисертацій Додаткова інформація про автора(ів) публікації: (cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці) ![](/irbis_nbuv/images/info.png) Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
|